ELISA

ELISA (singkatan bahasa Inggris: Enzyme-linked immunosorbent assay) atau 'penetapan kadar imunosorben taut-enzim' merupakan uji serologis yang umum digunakan di berbagai laboratorium imunologi. Uji ini memiliki beberapa keunggulan seperti teknik pengerjaan yang relatif sederhana, ekonomis, dan memiliki sensitivitas yang cukup tinggi. ELISA diperkenalkan pada tahun 1971 oleh Peter Perlmann dan Eva Engvall untuk menganalisis adanya interaksi antigen dengan antibodi di dalam suatu sampel dengan menggunakan enzim sebagai pelapor (reporter label).^[1]

Umumnya ELISA dibedakan menjadi dua jenis, yaitu competitive assay yang menggunakan konjugat antigen–enzim atau konjugat antobodi–enzim, dan non-competitive assay yang menggunakan dua antibodi. Pada ELISA non-competitive assay, antibodi kedua akan dikonjugasikan dengan enzim sebagai indikator. Teknik kedua ini seringkali disebut sebagai "Sandwich" ELISA.

Uji ini dilakukan pada plate 96-well berbahan polistirena. Untuk melakukan teknik "Sandwich" ELISA ini, diperlukan beberapa tahap yang meliputi:

1. Well dilapisi atau ditempeli antigen.
2. Sampel (antibodi) yang ingin diuji ditambahkan.
3. Ditambahkan antibodi kedua yang dikonjugasikan dengan enzim tertentu seperti peroksidase alkali. Antibodi kedua ini akan menempel pada antibodi sampel sebelumnya.
4. Dimasukkan substrat enzim yang dapat menimbulkan warna tertentu saat bereaksi.
5. Intensitas warna campuran diukur dengan spektrofotometer yang disebut ELISA reader hingga mendapatkan hasil berupa densitas optis (OD). Dengan menghitung rata-rata kontrol negatif yang digunakan, didapatkan nilai cut-off untuk menentukan hasil positif-negatif suatu sampel. Hasil OD yang berada di bawah nilai cut-off merupakan hasil negatif, dan demikian juga sebaliknya.

Uji ini memiliki beberapa kerugian, salah satu di antaranya adalah kemungkinan yang besar terjadinya hasil false positive karena adanya reaksi silang antara antigen yang satu dengan antigen lain.^[2] Hasil berupa false negative dapat terjadi apabila uji ini dilakukan pada window period, yaitu waktu pembentukan antibodi terhadap suatu virus baru dimulai sehingga jumlah antibodi tersebut masih sedikit dan kemungkinan tidak dapat terdeteksi.

Read More

DENSITOMETER

DENSITOMETER

Densitometer adalah alat yang didesign untuk mengukur denstitas optik. Densitometer bisa digunakan untuk mengukur densitas tinta printer atau densitas optic sebuah film.

Macam-macam Densitometer :

¢  Densitometer transmisi untuk mengukur objek transparan

Densitometer transmisi adalah sebuah cara untuk membaca sinar yang melewati objek transparan oleh sel fotoelektrik atau detector artinya sinar yang ditransmisikan melalui objek

¢  Densitometer refleksion untuk mengukur densitas optic yang direfleksikan oleh cahaya.

Densitometer adalah sebuah cara untuk membaca sinar yang direfleksikan oleh permukaan objek oleh sel fotoelektrik atau detector

Komponen Densitometer :

Sumber cahaya yang stabil

Optik untuk memfokuskan sinar agar sinar jatuh tepat pada sampel

Penyaring untuk menentukan respon spectral unit

Detector untuk membaca sinar yang direfleksikan

Amplifier logarithmic

Layar display

Mekanisme Kerja

Sinari sampel  dari dari sudut 90⁰ dan pembacaan terlihat pada sudut 45⁰ dari permukaan sampel untuk menghindari efek glossy

Lalu hasil pembacaan refleksi terbaca oleh detector penyaring kemudian dikonversi menjadi suatu fungsi logaritma yang bisa diperbesar dan ditampilkan pada display.

Read More

BLOOD GAS ANALYZER

BLOOD GAS ANALYZER

Yaitu alat yang digunakan untuk menentukan konsentrasi gas yang ada di dalam darah seperti CO2 dan O2, mengukur pH dan mengukur elektrolit seperti potasium, natrium, zat kapur serta klorid

Komponen Blood Gas Analyzer:

Ion Selective Electrode modules

Reagent chambers

Humidifier wells

Sample Input port

Peristaltic Pump

Waste module

Standard  Elektroda:

•      pH modules

Memproduksi berbagai tingkatan keluaran yang sebanding dengan pH sampel  yang sedang dianalisa

•       pCO2 modules

Memproduksi  voltase yang sebanding dengan konsentrasi  CO2  pada sampel.

•       pO2 modul

Menghasilkan  voltase yang sebanding dengan konsentrasi O2 pada  sampel.

•       Acuan Electroda

Menyediakan potensial elektrik yang konstan dan stabil (756mV) yang digunakan sebagai petunjuk untuk mengukur potensial elektrik yang diproduksi oleh setiap pengukuran elektroda.

•      Heater menjaga/mempertahankan  standar elektroda pada suhu 37⁰C

•       Sensor suhu Menunjukan temperatur ketika suhu turun atau naik 2 derajat di atas 37⁰C

•       Udara Alir detector Berada  di tempat masuk atau keluar dari standar elektrooda. Memeriksa adanya udara atau cairan di dalam tabung sampel.

ü   Sumber cahaya menghasilkan sinar yang akan melewati tubing ke fotodetektor

ü   Fotodetektor dimonitor oleh uP yang memonitor detector udara/cairan jadi dapat mendeteksi pompa peristaltic ketika mulai atau berhenti.

ü    Tempat reagen standar dari dua larutan digunakan untuk mengkalibrasi pH eleektroda dan larutan pencuci.

ü    Ada dua larutan yang bisa digunakan untuk mengkalibrasi pH elektroda selama proses kalibrasi

ü    Larutan pencuci digunakan untuk mencuci sampel setelah dianalisis.

PELEMBAB UDARA

Digunakan untuk menjenuhkan gas yang akan digunakan untuk mengkalibrasi elektroda pO2 dan pCO2 dengan air.

TEMPAT SAMPEL

¢  Adalah tempat dimana sampel dimasukkan untuk dianalisis.

POMPA PERISTALTIK

¢  Masukkan reagen dan sampel melalui tubing ke dalam standar elektroda di luar botol pencuci.

¢  Cairan akan dihisap ke dalam analiser ketika tubing ditekan oleh pompa roller. Ini terjadi karena terjadi tekanan pada roler kepada tubing.

PEMBUANGAN

•      Kumpulkan limbah setelah analisis. Hal ini harus dilakukan secara rutin

Keterangan:

•      Tempat pembuangan berisi darah. Buang limbah di tempat sampah biohazaard. Jangan buang limbah pada tempat yang kering.

Read More

AUTOANALYZER

AUTOANALYZER

PENGERTIAN

¢  Adalah alat yang memiliki presisi tinggi dan mudah digunakan dan digunakan untuk mengotomatisasi pemeriksaan kimia basah tradisional.

JENIS AUTOANALYZER

¢  CFA (Continuos Flow Analyzer)

¢  FIA (Flow Injection Analyzer)

CFA (Continuos Flow Analyzer)

¢  Prinsipnya, gelembung udara membawa sampel ke tiap ruangan pemeriksaan dalam mesin untuk kemudian dianalisa. Metode ini bisa ddipercaya untuk memeriksa 90 sampel per jam. Meskipun pada saat melewati batas kuota pemeriksaan per jam dapat meningkatkan cross contamination.

FIA (Flow Injection Analyzer)

¢  Prinsip kerjanya, tiap sampel dilarutkan dalam pelarut masing masing untuk kemudian dimasukkan kedalam mesin. Udara tidak mengambil peran dalam sistem ini. Bagian dari sampel dimasukkan kedalam ruang pemeriksaan untuk kemudian diperiksa. Meskipun sistem ini memilii berbagai macam keterbatasan namun sistem ini memberi jalan kepada produsen untuk memperkecil ukuran autoanalyzer.

KOMPONEN

¢  Sampler

¢  Micropump

¢  Cartridge Base & Analytical Cartridge

¢  Docking Photometer base

¢  Digital Detector

¢  Data Acquisition system

¢  Surfactants

SAMPLER

¢  Memasukkan sampel pada reagen dari analytical cartridge secara otomatis menggunakan sebuah probe yang otomatis bergerak diantara sampel dan cairan pencuci dengan interval waktu yang tepat.  Sampel ditampung pada tabung atau sample cups.

MICROPUMP

¢  Memindahkan sampel dan reagen bersama kedalam anlalytical cartridge menggunakan gerak peristaltic yang dihasilkan oleh pump tersebut.

Cartridge Base & Analytical Cartridge

¢  Cartridge base adalah tempat untuk Analyticasl Cartridge. Fungsinya adalah untuk mengatur suhu dengan digital heat controller.

¢  Analytical Cartridge adalah cartridge yang diatur khusus yang digunakan untuk berbagai macam pemeriksaan

¢  Kedua instrumen ini memiliki:
Glass mixing coils and fittings
Heath bath
Dialyzers
Phase separator
Flowcell

Docking Photometer Base

¢  Instrumen ini menyediakan arus listrik DC yang teratur yang mampu menyuplai 3 buah fotometer dengan kebutuhan 305A. Instrumen ini menyediakan sumber cahaya kepada fotometer.

DIGITAL DETECTOR

¢  Digital Detector mengukur absorbance dari produk berwarna yang dihasilkan oleh reaksi antara sampel dan reagen. Digital detector ini mengubah sinyal dari absorbance tersebut menjaddi sinyal elektronik digital.

¢  Digital detector menggunakan wavelength filter dan flowcell yang mudah untuk diubah.

Data Acquisition system

¢  Menyediakan hardware control dan “data reduction” dari 8 detector secara simultan. Ini merupakan aplikasi yang terintegrasi dengan windows.

SURFACTANT

¢  Menurunkan tegangan permukaan dari “flow stream” dam menurunkan tekanan balik dari analyzing cartridge. Ini membuat bubble injection dan fluid flow untuk mengalir secara lembut dan lancar.

Read More